04.02.2019
1532
4
На пятый день развития эмбриона (стадия бластоцисты) проводится биопсия трофэктодермы (внешнего слоя клеток).
В цикле ЭКО-ПГД получают обычно несколько эмбрионов, что позволяет выбрать эмбрион без генетического нарушения. Возможность диагностики ещё до наступления беременности является главным преимуществом ПГД.
Идея применения методов преимплантационной генетики в клинической практике возникла давно. Еще в 1967 г. R.Edwards и R.Gardner успешно определяли пол у эмбрионов кролика, находящихся на стадии бластоцисты, и затем переносили их в полость матки. Уже тогда эти ученые предсказывали применение аналогичных технологий у человека во избежание передачи наследственных заболеваний от родителей детям. Однако, это стало возможным лишь в начале 90-х годов, когда была разработана техника полимеразной цепной реакции (ПЦР), которая позволяла определять мутации в единичных клетках.
В 1989 году проведена первая успешная попытка определения пола при помощи ПЦР-анализа бластомера, взятого у эмбриона на стадии дробления (6-8 бластомеров). Первые успешные роды после подобной процедуры у супружеских пар с риском по рецессивному Х-сцепленному заболеванию состоялись в 1990 году.
В настоящее время сформулированы основные показания для ПГД:
• пары, у которых в анамнезе были случаи рождения детей с наследственной и врожденной патологией;
• пары, в кариотипе которых имеются сбалансированные хромосомные аберрации;
• пары, возраст которых превышает 35 лет;
• пары, в анамнезе которых было 2 и более неудачных попыток ЭКО;
• пары, у которых в анамнезе были случаи пузырного заноса, невынашивание беременности;
• пары, с мужским фактором бесплодия;
Преимущества преимплантационной диагностики:
• Выбор и перенос в матку только тех эмбрионов, которые не имеют хромосомных патологий
• Снижение риска рождения ребёнка с определёнными генетическими дефектами
• Снижение риска невынашивания (примерно в 2 раза)
• Снижение риска многоплодия (примерно в 2 раза)
• Увеличение шанса на успешную имплантацию (примерно на 10%)
• Увеличение шансов на благополучное рождение ребёнка (примерно на 15-20%).
Риск при проведении преимплантационной диагностики:
• Риск случайного повреждения эмбриона (<1%)
• Ошибочная диагностика (до 10%)
• 3,5% вероятности того, что эмбрион с патологией будет диагностирован как нормальный.
Существует несколько методов ПГД :
1. FISH-метод. Чаще всего используется для снижения риска выкидыша и повышения шансов на наступление беременности. Клеточному исследованию подвергается заранее взятая клетка эмбриона методом флуоресцентной гибридизации. В ядро исследуемой клетки помещаются специальные зонды, которые соответствуют той или иной цепочке ДНК. В процессе изучения получаемого свечения и выявляются ее поврежденные участки. FISH метод является методом быстрого проведения генетического анализа и дает возможность получить результат в короткое время. С помощью этого метода по флуоресценции зондов можно определить структурные перестройки хромосом и выявить число копий хромосом в интерфазных ядрах. Однако этим методом можно оценить ограниченное количество хромосом. В большинстве случаев используют набор реактивов (зонды), которые позволяют проанализировать хромосомы Х, Y, 13, 18, 21.
2. Метод ПЦР. Актуален в случаях, когда у обоих партнеров имеются какие-либо хромосомные или генетические отклонения. Состоит в получении копий конкретных участков цепочки ДНК эмбриона. В данном случае нужно, чтобы отобранный участок имел строгое соответствие специальным требованиям. Этот способ помогает распознать наличие основных видов моногенных отклонений. Применяя технику ПЦР, можно диагностировать заболевания, связанные с доминантными и рецессивными мутациями в уникальных генах, определять антигены системы HLA, а также резус принадлежность эмбрионов.
3. Одним из распространенных генетических методов исследования является метод сравнительной геномной гибридизации (Comparative Genomic Hybridization — CGH). Данный метод позволяет осуществить исследование одновременно всех хромосом в эмбрионе (все 24 хромосомы) на предмет патологий. Принцип метода основан на конкурентной гибридизации in situ двух геномных образцов (один получен из анализируемой ткани (или единичных клеток), второй — контрольной) с array платформой (ДНК-проба, нанесенная на стекло, так называемый чип). Геномные образцы предварительно мечены разными флуорохромами. Заключение о количестве копий хромосомного материала делают по интенсивности свечения флуорохромов в каждом участке хромосомы.
4. Самым инновационным методом в области ПГД является метод NGS (next generation sequencing, высокопроизводительное секвенирование). Принцип метода NGS принципиально отличается от других методов ПГД. Данный метод основан на определении последовательности ДНК, что открывает новые возможности в диагностике генетической патологии. Его достоверность составляет примерно 99.9%. В ходе процедуры стало возможным проверить сразу все 23 пары хромосом, что практически исключает вероятность ошибки. Высокопроизводительное секвенирование (NGS), более четко указывает на наличие мозаицизма у преимплантационных эмбрионов, что позволяет выбрать генетически здоровые эмбрионы для переноса и повысить уровень наступления беременности.
В ожидании результатов анализа эмбрионы замораживают путем витрификации. Перенос диагностированных эмбрионов осуществляется в криоцикле, исключая риск гиперстимуляции и повышая успешность имплантации эмбрионов в полости матки. Группа компаний «Мать и дитя» имеет собственную эмбриологическую и генетическую лабораторию, что позволяет использовать ПГД в различных ЭКО-протоколах. А высокая квалификация специалистов, современное оснащение и практика использования только проверенных и рекомендованных методик позволяют получать высокую достоверность результатов при невысоком риске осложнений.
Наша задача – не просто получить беременность, а получить здоровое потомство с помощью методов ВРТ!
Авторы статьи
Морозова Екатерина Геннадьевна
- Репродуктолог