Метод лечения ИКСИ является одним из вспомогательных методов искусственного оплодотворения яйцеклеток, оплодотворения вне организма женщины.
Метод ИКСИ начал использоваться в 1992 году для лечения пар с тяжелым мужским фактором бесплодия. Однако за последние три десятилетия использование метода ИКСИ значительно возросло, даже среди пациентов без мужского фактора бесплодия.
По данным литературы пары с бесплодием без мужского фактора, традиционное ЭКО было связано с лучшими показателями оплодотворения и имплантации, но с сопоставимыми показателями живорождения по сравнению с ИКСИ. Также по данным исследований метод ИКСИ был предложен парам с необъяснимым бесплодием, с целью снижения частоты неудач оплодотворения. Тот факт, что пациенты старшего репродуктивного возраста имеют сниженный потенциал фертильности, может объяснить склонность к проведению ИКСИ для «обеспечения» максимального оплодотворения.
ИКСИ - что это за процедура?
ИКСИ расшифровывается как интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида. При использовании метода ИКСИ в программе ЭКО проводится инъекция или введение сперматозоида в цитоплазму яйцеклетки.
Кому рекомендовано оплодотворение методом ИКСИ?
Изначально показанием для ИКСИ было мужское бесплодие, которое препятствовало нормальному проникновению сперматозоида и оплодотворению ооцита из-за низкого количества доступных сперматозоидов, нарушенной подвижности или аномальной морфологии.
Однако показания для использования ИКСИ расширились, чтобы учесть влияние других репродуктивных технологий, таких как инсеминация ранее криоконсервированных и инвитро созревших ооцитов, из-за затвердевания блестящей оболочки (zona pellucida), препятствующей естественному проникновению сперматозоидов.
Кроме того, ИКСИ обычно выполняется на ооцитах для получения эмбрионов, которые будут проверены на генетическое заболевание или статус плоидии с помощью ПГТ, чтобы снизить вероятность загрязнения ДНК спермы, которое может повлиять на результаты тестов.
Более того, чтобы снизить риск между парами с дискордантными HBV, HCV и ВИЧ, часто выбирают ИКСИ, так как использование одного сперматозоида для инсеминации в сочетании с удалением семенной жидкости во время обработки спермы значительно снижает вероятность вирусной передачи. Дополнительные рекомендации по лечению с помощью ИКСИ, некоторые из которых могут зависеть от предпочтений каждого отдельного центра, включают низкий выход и зрелость ооцитов, дисморфные ооциты и предыдущую плохую оплодотворяемость при стандартном ЭКО. Однако одно из самых уникальных показаний для ИКСИ, которое, безусловно, является исключительным для этого метода ВРТ - это использование хирургически извлеченных сперматозоидов для пар, в которых мужчина страдает азооспермией.
Как проводится отбор сперматозоидов для проведения ИКСИ?
Считается, что методы отбора сперматозоидов повышают вероятность того, что для оплодотворения будут выбраны структурно неповрежденные и зрелые сперматозоиды.
Методы отбора сперматозоидов включают:
- ПИКСИ - способность зрелых сперматозоидов связываться с гиалуроновой кислотой;
- ИМСИ - оценка морфологии сперматозоидов под сверхвысоким увеличением микроскопа.
Метод ПИКСИ основан на отборе зрелых сперматозоидов в результате их связывания с гиалуроновой кислотой. Качественные зрелые сперматозоиды имеют рецепторы к основному компоненту оболочки яйцеклетки – гиалуроновой кислоте (ГК). Сперматозоиды помещают в пластиковую культуральную чашку с пятнами ГК, прикрепленными к ее основанию. Сперматозоиды, которые связались с ГК, отбираются для ИКСИ. ГК используется в качестве «физиологического селектора» зрелых неповрежденных сперматозоидов.
Метод ИМСИ основан на интрацитоплазматической инъекция морфологически отобранных сперматозоидов.
Незначительные дефекты морфологии сперматозоидов (акросома, ядро, митохондрии, хвост) можно наблюдать с помощью микроскопа со сверхвысоким увеличением в 6000 раз. Внутрицитоплазматическая инъекция морфологически отобранных сперматозоидов (ИМСИ) является модификацией ИКСИ, в которой используется этот метод.
Каждый метод отбора сперматозоидов использует различные характеристики структуры, физиологии или функции сперматозоидов, чтобы способствовать отбору наиболее нормальных сперматозоидов. Выбор наиболее подходящих сперматозоидов для оплодотворения может помочь улучшить оплодотворение и качество эмбрионов. Усовершенствованные протоколы отбора сперматозоидов направлены на улучшение результатов ВРТ.
Не рекомендован рутинный отбор сперматозоидов методами ПИКСИ и ИМСИ, однако они допустимы у пациентов с повторными неудачами имплантации и привычным выкидышем.
В чем разница между оплодотворением методом ЭКО и ИКСИ?
Интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида (ИКСИ) предполагает введение одного сперматозоида в цитоплазму яйцеклетки для достижения оплодотворения. ИКСИ обычно используется для лечения мужского бесплодия, когда параметры спермы плохие, когда сперму получили хирургическим путем, когда повторное оплодотворение с помощью стандартного ЭКО оказалось неудачным, а также при использовании ооцитов после криоконсервации и размораживания, при проведении преимплантационного генетического тестирования, в программах с дозреванием ооцитов.
На успешное развитие эмбриона и последующий исход беременности будет влиять качество спермы, оплодотворяющей яйцеклетку. В идеале для ВРТ следует использовать сперму с высокой вероятностью успешного оплодотворения и последующего роста эмбриона. Эти сперматозоиды будут жизнеспособными и зрелыми, структурно здоровыми.
Подготовка и отбор спермы при ЭКО ограничиваются промывкой и центрифугированием спермы. При оплодотворении методом ЭКО к одной яйцеклетке добавляют 50000-100000 подвижных сперматозоидов, и они самостоятельно оплодотворяют яйцеклетку. При оплодотворении методом ИКСИ отбор сперматозоидов основан на оценке подвижности и общей морфологии сперматозоидов под микроскопом с увеличением от 200 до 400 раз.
Методы отбора сперматозоидов, основанные на альтернативных характеристиках, позволяют выбирать наиболее подходящие сперматозоиды для использования в программе ЭКО+ИКСИ.
Как происходит процедура оплодотворения методом ИКСИ?
Этапы проведения ИКСИ.
Решение о методе инсеминации принимает лечащий врач. Для циклов, где используется метод ИКСИ оценка зрелости яйцеклеток проводится через 2 часа после пункции. Ооциты, которые не завершили созревание, утилизируются. Зрелые ооциты оплодотворяются методом ИКСИ с использованием сперматозоидов партнера. Процедуру ИКСИ проводят под микроскопом, используя стеклянные инструменты — иглу и присоску. Инструменты присоединены к манипуляторам — устройствам, позволяющим переводить движения рук в движения инструментов. Для ИКСИ эмбриолог отбирает наиболее подвижные и морфологически нормальные сперматозоиды. Затем, удерживая яйцеклетку на присоске, иглой прокалывает оболочку яйцеклетки и внутрь яйцеклетки вводит сперматозоид.
Как оценивают оплодотворение яйцеклетки сперматозоидом в результате ИКСИ?
Оплодотворение оценивается через 16–18 часов после инсеминации по появлению двух отдельных пронуклеусов и двух полярных телец. В отличие от ИКСИ при традиционном ЭКО ооцито-кумулюсные комплексы инсеминируются с использованием 100 000 подвижных сперматозоидов на чашку для инсеминации, содержащую 3–5 ооцитов. Статус зрелости ооцитов не проверяется до 16–18 часов, когда все инсеминированные ооциты отделяются от кумулюсных клеток, проводится проверка на оплодотворение, а статус зрелости не оплодотворенных ооцитов фиксируется.
Таким образом, выбор метода инсеминации должен основываться на параметрах спермы в сочетании с предыдущей историей пациента, независимо от резерва яичников, в том числе для женщин позднего репродуктивного возраста.
